血管紧张素1-7对氧糖剥夺神经胶质瘤细胞U373的保护作用

目的 研究血管紧张素1-7(Ang1-7)对氧糖剥夺神经细胞凋亡的影响.方法 用厌氧培养箱模拟缺氧环境,用EBSS(NaCl 116,KCl 5.36,MgSO40.81,NaH2PO4 1.0,hydroxyethyl piperazine ethanesulfonic acid (HEPES) 10,CaCl2 1.8,NaHCO3 14.7,单位均mmol·L-1)培养基制造缺糖环境,对培养的U373细胞制作氧糖剥夺模型.实验分4组:正常组未经氧糖剥夺(OGD)处理,模型组以OGD处理3h;单用实验组和联用实验组以OGD处理的同时,分别加入终浓度为1×10-7mol·L-1血管紧张素1-7处理、终浓度为1×10-5 mol· L-1肽类激素(A779)和1×10-7 mol·L-1 Ang1-7联合处理.用显微镜观察细胞形态,以噻唑蓝(MTT)法研究细胞活力,以Annexin V-FITC法结合流式细胞术研究细胞凋亡情况.结果 与模型组相比,单用实验组改善了氧糖剥夺后U373细胞的形态,突触细长,联用实验组的细胞损伤比较严重,其形态接近模型组.正常组细胞的活力设定为1.00,则模型组细胞活力为0.45,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).单用实验组的细胞活力为0.70,与模型组相比,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).在联用实验组中,由于加入了A779,使得细胞活力降低为0.51,接近模型组水平,说明A779破坏了Ang1-7的保护作用,Ang1-7的保护作用是通过Mas受体介导的.正常组的细胞凋亡率为43.01％,模型组的细胞凋亡率为83.24％,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).与模型组相比,单用实验组的细胞凋亡率为58.46％,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05),说明Ang1-7对OGD后的U373细胞起到保护作用.联用实验组的细胞凋亡率为76.78％,接近模型组水平,说明A779能够拮抗Ang1-7的保护作用.结论 Ang1-7通过Mas受体减轻细胞凋亡,对氧糖剥夺的U373细胞有保护作用.