目的探讨纳米氧化铅(PbO NPs)暴露对小鼠海马组织小胶质细胞极化的影响.方法 (1)将无特定病原体级雄性C57小鼠随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只.后3组小鼠每天分别腹腔注射剂量为5、10和20 mg/kg 的PbO NPs混悬液,对照组小鼠予腹腔注射等体积0.9%氯化钠溶液,每周5 d,共4周.(2)采用剂量为0.0、2.5、5.0和10.0 mg/L的 PbO NPs混悬液处理BV-2细胞24 h.(3)将BV-2细胞随机分为对照组、PbO NPs组和髓样细胞触发受体2(TREM2)高表达+PbO NPs组.其中,对照组细胞不做任何处理;PbO NPs组细胞予质量浓度为10.0 mg/L的PbO NPs混悬液染毒24 h;TREM2高表达+PbO NPs组细胞在转染Trem2高表达质粒的基础上,予质量浓度为10.0 mg/L的PbO NPs混悬液染毒24 h.(4)小胶质细胞M1型标志物[一氧化氮合成酶(iNos)、环氧化酶2(Cox2)、趋化因子受体7(Ccr7)]、M2型标志物[精氨酸-1(Arg-1)、转化生长因子-β(Tgf-β)、趋化因子受体2(Ccr2)]和髓样细胞触发受体2(Trem2)的mRNA表达均采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测;iNOS、ARG-1和TREM2蛋白表达均采用蛋白质印迹法检测.结果 (1)实验期间,4组小鼠体质量比较,差异无统计学意义(P>0.05).与对照组比较,低剂量组小鼠海马组织中Cox2、Ccr7和中剂量组、高剂量组细胞iNos、Cox2、Ccr7的mRNA相对表达水平均升高(P值均<0.05),低剂量组小鼠海马组织中Tgf-β和中剂量组、高剂量组细胞Arg-1、Tgf-β、Ccr2的mRNA相对表达水平均下降(P值均<0.05).与低剂量组比较,高剂量组小鼠海马组织中iNos、Cox2和Ccr7的mRNA相对表达水平均升高(P值均<0.05),Arg-1、Tgf-β和Ccr2的mRNA相对表达水平均下降(P值均<0.05).中和高剂量组小鼠海马组织中Trem2 mRNA和TREM2蛋白的相对表达水平均低于对照组(P值均<0.05),高剂量组小鼠海马组织中上述2个指标分别低于低剂量组和中剂量组(P值均<0.05).随着PbO NPs染毒剂量的增加,小鼠海马组织中iNOS蛋白相对表达水平升高(P<0.01),ARG-1蛋白相对表达水平下降(P<0.01).(2)随着PbO NPs染毒剂量的增加,BV-2细胞中iNOS蛋白相对表达水平升高(P<0.01),ARG-1蛋白相对表达水平下降(P<0.01).与对照组比较,PbO NPs组和TREM2高表达+PbO NPs组BV-2细胞中iNOS蛋白相对表达水平均升高(P值均<0.05),ARG-1蛋白相对表达水平均下降(P值均<0.05);与PbO NPs组比较,TREM2高表达+PbO NPs组BV-2细胞中iNOS蛋白相对表达水平下降(P<0.05),ARG-1蛋白相对表达水平升高(P<0.05).结论 PbO NPs暴露可导致小胶质细胞M1型极化增加,M2型极化减少,呈一定程度的剂量-效应关系;Trem2基因高表达后,小胶质细胞M1型极化下降,M2型极化升高.TREM2调控小胶质细胞极化可能参与了PbO NPs的神经毒性作用.

纳米氧化铅暴露对小鼠海马组织小胶质细胞极化影响