黄芩多糖对PRV感染猪睾丸细胞的作用及其差异基因表达分析

为研究黄芩多糖对伪狂犬病毒(PRV)感染猪睾丸(ST)细胞的作用并筛选与调控相关的差异基因,本试验建立PRV感染ST细胞模型,将其分为预防、治疗和杀毒模式,分别使用不同浓度的黄芩多糖溶液进行处理,每个模式下设立空白对照组和PRV对照组.采用 CCK-8 法检测黄芩多糖对 ST 细胞存活率的影响,显微镜观察各组细胞形态,ELISA 检测IFN-γ、IFN-α和TNF-α细胞因子含量;在24h时提取RNA进行转录组测序,分析其差异表达基因并进行GO功能和KEGG通路分析.结果显示,PRV感染ST细胞出现病变.与PRV对照组相比,黄芩多糖浓度为97.66 μg/mL时,3 种模式中细胞存活率均极显著升高(P<0.01),细胞病变减轻,IFN-γ和 IFN-α含量均极显著提高(P<0.01),TNF-α含量极显著降低(P<0.01),治疗指数(TI)分别为2、4 和4.治疗模式下,97.66 μg/mL黄芩多糖处理组、空白对照组和PRV对照组比较共交集差异基因74 个,其中SOCS3、VEGFA、ZBTB18、CLCN6、RSBN1、RBM47 和TET2 基因差异表达较为显著,差异表达基因显著富集到15 条信号通路,PRV对照组与空白对照组和PRV对照组与黄芩多糖治疗组比较,差异表达基因主要分别涉及核糖体、内吞、MAPK、TNF和MAPK、mTOR、TLR等相关通路.结果表明,黄芩多糖对PRV感染ST细胞具有保护作用,其作用可能是通过调节TNF信号通路和TLR信号通路中SOCS3、CCL5、FOS、PIK3R1 和MAP3K8 等相关基因的表达来实现.本试验结果将为进一步探索黄芩多糖调控PRV感染宿主的作用机制提供理论依据.