蝎毒多肽提取物联合雷帕霉素增强H_（22）肝癌细胞自噬作用的机制研究

目的观察蝎毒多肽提取物（polypeptide extract from scorpion venom,PESV）联合雷帕霉素（Rapamycin）对H22肝癌肿瘤细胞自噬的增强作用并探讨其作用机制。方法 40只昆明小鼠,采用皮下接种H22肝癌肿瘤细胞悬液法建立荷瘤模型,随机分为荷瘤对照组、PESV高剂量组、PESV低剂量组及联合组（PESV高剂量加雷帕霉素）,每组10只。PESV高、低剂量组分别予20 mg/kg、10 mg/kg的PESV灌胃,联合组予雷帕霉素（2 mg/kg）及PESV（20 mg/kg）灌胃,连续给药干预14天,隔日测量肿瘤体积,记录肿瘤生长曲线,计算抑瘤率。HE染色观察各组肿瘤组织病理变化。免疫组织化学法检测各组肿瘤组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammal target of rapamycin,m TOR）、UNC51样激酶1（UNC-51-like kinase-1,ULK1）、微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein 1 light chain 3,MAP1LC3A）及B淋巴细胞瘤蛋白质-2-相互作用蛋白质-1（Beclin1）蛋白表达水平。结果与荷瘤对照组比较,PESV高、低剂量组及联合组肿瘤生长受到明显抑制（P＜0.05）;与PESV高、低剂量组比较,联合组瘤重及体积明显减小（P＜0.05）,PESV高、低剂量组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。免疫组织化学法显示,与荷瘤对照组比较,PESV高、低剂量组及联合组m TOR表达水平降低（P＜0.05）,ULK1、MAP1LC3A及Beclin1蛋白表达水平升高（P＜0.05,P＜0.01）。与PESV高剂量组比较,联合组ULK1、MAP1LC3A及Beclin1蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）。结论蝎毒多肽提取物联合化疗可能是通过抑制m TOR的活性,增强自噬相关蛋白ULK1、MAP1LC3A及Beclin1的表达,促进细胞自噬从而抑制肿瘤的发展。