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CAMPILOBACTERIOSE EM FORTALEZA, USO DE TÉCNICAS MOLECULARES PARA DIAGNÓSTICO COMPARATIVO EM RELAÇÃO AO ENSAIO IMUNOENZIMÁTICO

Tamara Silva Rodrigues,Herlice do Nascimento Veras, Thiago M. Freitas, Claudiane Carvalho Bessa, Aldo Ângelo Moreira Lima, Alexandre Havt Binda

Encontros Universitários da UFC(2017)

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摘要
O diagnostico de campilobacteriose e prejudicado devido as caracteristicas fastidiosas deste micro-organismo. Metodos moleculares e imunoenzimaticos possuem uma maior sensibilidade, desafiando o diagnostico convencional por cultura. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo comparar metodos moleculares e imunoenzimaticos com o teste padrao-ouro para deteccao de Campylobacter spp quanto a sensibilidade, especificidade e valor preditivo positivo (VPP) de cada um deles. 153 amostras de fezes de criancas (0-24 meses) com evento diarreico foram testadas para Campylobacter spp. utilizando diagnostico microbiologico, ELISA e testes moleculares (PCR e qPCR). As amostras fecais foram cultivadas em agar Columbia suplementadas com 5% de sangue de carneiro. O DNA foi extraido utilizando QIAamp DNA de fezes Mini kit (QIAGEN, Valencia, EUA). O gene utilizado para o diagnostico molecular de Campylobacter spp., foi o gyrA (DNA girase subunidade A). 22,2 % das amostras foram positivas para Campylobacter spp.. O metodo convencional por cultura detectou 13,07 % de amostras positivas enquanto o ELISA, qPCR e PCR detectaram 37,9%, 29,4 % e 20,3%, respectivamente. 13 amostras foram positivas para todos os metodos de diagnostico, e 12 amostras foram positivas para todos os metodos, exceto para o metodo microbiologico convencional. Entre os resultados positivos para a cultura, 4 nao foram positivos para PCR, e 2 nao foram positivos para qPCR. A cultura foi o unico metodo que atingiu 100% de especificidade. Por outro lado, o ELISA demonstrou a maior sensibilidade (100%), porem com a menor especificidade e PPV (80% e 24%). Os metodos moleculares demonstraram especificidade maior que o ELISA (97%) associada a uma sensibilidade consideravel (91% qPCR, 84% PCR). Conclui-se que qPCR sozinho ou PCR combinado ao ELISA podem ser alternativas eficazes para o diagnostico de especies de Campylobacter. Entretanto, a cultura e o unico metodo 100% especifico.
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