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温阳振衰颗粒通过调节lncRNA LOC103694972/miR-29c-3p减轻TGF-β1诱导NRK-49F细胞的纤维化

LI Yan,LIU Youhui,CAI Huzhi,LIN Xiangdong, CHEN Xinyu

Journal of Traditional Chinese Medicine University of Hunan(2023)

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摘要
目的 探讨温阳振衰颗粒通过lncRNA LOC103694972/miR-29c-3p对TGF-β1诱导的大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)的纤维化的影响.方法 采用TGF-β1(10 ng·mL-1)处理NRK-49F细胞24 h,构建纤维化细胞模型.造模结束后给予空白血清、温阳振衰颗粒含药血清和缬沙坦胶囊含药血清干预.CCK-8法检测温阳振衰颗粒对NRK-49F增殖的影响.实时荧光定量PCR检测LOC103694972和miR-29c-3p表达.Western blot法检测纤维化相关因子Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.同时研究过表达或沉默LOC103694972,温阳振衰颗粒含药血清对TGF-β1干预的NRK-49F细胞的影响.双荧光素酶报告实验检测LOC103694972与miR-29c-3p之间的调控作用.结果 温阳振衰颗粒明显减弱TGF-β1诱导的细胞增殖和LOC103694972的表达(P<0.05),促进miR-29c-3p的表达(P<0.05),其干预效果与缬沙坦胶囊含药血清效果一致.双荧光素酶实验证实LOC103694972靶向调控miR-29c-3p.过表达LOC103694972促进温阳振衰颗粒含药血清干预下TGF-β1诱导NRK-49F细胞的活力,以及α-SMA蛋白、Collagen Ⅰ蛋白的表达(P<0.05).而沉默LOC103694972具有相反的效果(P<0.05).结论 温阳振衰颗粒通过下调LOC103694972促进miR-29c-3p的表达,进而抑制TGF-β1诱导的NRK-49F细胞纤维化.
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关键词
Wenyang Zhenshuai Granules,transforming growth factor β1,LOC10369497,miR-29c-3p,fibrosis,NRK-49F cell
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