温阳复元方对脑缺血再灌注损伤大鼠线粒体铁死亡相关蛋白IRP1和FAM96A表达的影响

目的 观察温阳复元方对脑缺血再灌注后大鼠铁调节蛋白1(IRP1)和96 序列相似家庭成员A(FAM96A)表达的影响,探讨其脑保护机制.方法 将 84 只SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、温阳复元方组和补阳还五汤组,每组21 只.除假手术组外,其余组采用改良Longa线栓法建立脑缺血再灌注模型.温阳复元方组和补阳还五汤组大鼠在造模前30 min分别给予温阳复元方14.04 g/kg和补阳还五汤11.43 g/kg灌胃,大鼠清醒后1h继续予以原方灌胃,假手术组、脑缺血再灌注组给予生理盐水灌胃.分别于再灌注12 h、24 h、3 d时对各组大鼠进行神经功能缺损评分,随后处死大鼠取脑组织,分别采用RT-qPCR、免疫组化法检测缺血灶脑组织中IRP1、FAM96A mRNA和蛋白表达情况.结果 脑缺血再灌注组大鼠再灌注12 h、24 h、3 d时神经功能缺损评分均明显高于假手术组(P均<0.05);温阳复元方组大鼠再灌注12 h、24 h、3 d时神经功能缺损评分均明显低于同期脑缺血再灌注组(P均<0.05),且再灌注 3d时明显低于同期补阳还五汤组(P<0.05);补阳还五汤组仅在再灌注12h时神经功能缺损评分明显低于脑缺血再灌注组(P<0.05).脑缺血再灌注组再灌注12 h、24 h、3 d时IRP1、FAM96A mRNA相对表达量和蛋白表达平均光密度值均明显高于同期假手术组(P均<0.05);温阳复元方组IRP1、FAM96A mRNA相对表达量和蛋白表达平均光密度值随再灌注时间延长逐渐降低,再灌注3d时最低,与脑缺血再灌注组相应时间点比较差异均有统计学意义(P均<0.05),且再灌注3d时IRP1 mRNA相对表达量和再灌注24 h、3 d时FAM96A mRNA相对表达量及IRP1、FAM96A蛋白表达平均光密度值均明显低于同期补阳还五汤组(P均<0.05);补阳还五汤组IRP1、FAM96A mRNA相对表达量和蛋白表达平均光密度值随再灌注时间延长逐渐升高,但再灌注12 h、24 h时均明显低于同期脑缺血再灌注组(P均<0.05),再灌注3d时与脑缺血再灌注组比较差异均无统计学意义(P均>0.05).结论 温阳复元方可以通过下调IRP1 和FAM96A表达起到保护大鼠脑缺血再灌注损伤的作用.