干扰素调节因子4基因敲除加重缺血性脑卒中小鼠脑神经功能损伤

目的:明确缺血性脑卒中(IS)后不同区域脑组织中干扰素调节因子4(IRF4)表达水平的变化趋势并探讨其在IS后神经功能损伤中的保护作用与可能机制.方法:首先通过短暂性大脑中动脉闭塞(tMCAO)构建小鼠IS模型(包括野生型和IRF4基因敲除组),随后分别利用RT-PCR与Western Blot检测核心梗死区域、缺血半暗带与对侧正常脑组织内IRF4mRNA与蛋白表达水平.同时利用ELISA检测缺血半暗带区域促炎细胞因子IL-1β、IL-6与TNF-α的表达水平.分别利用RT-PCR与Western Blot检测M1型巨噬细胞标志物iNOS与M2型巨噬细胞标志物Arg-1的mRNA与蛋白表达水平;随后进行神经功能评分与水迷宫试验检测逃逸潜伏期(EL),利用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测小鼠脑梗死体积,同时利用免疫荧光染色检测细胞凋亡.结果:缺血半暗带IRF4表达水平较核心梗死区域与对侧正常脑组织均明显增加.此外,缺血半暗带促炎细胞因子IL-1β、IL-6与TNF-α表达均明显增加,且与IRF4表达水平呈明显负相关;iNOS表达明显上调且Arg-1表达显著减少.而IRF4基因敲除导致IS小鼠脑梗死体积增加且神经功能明显恶化.IRF4基因敲除致使1S小鼠脑组织促炎细胞因子表达显著上调,巨噬细胞标志物检测表明IRF4基因敲除致使巨噬细胞向M1型极化.此外,IRF4基因敲除导致神经元凋亡明显增加.结论:IS显著诱导缺血半暗带IRF4表达,IRF4敲减可导致IS小鼠炎症反应加重,巨噬细胞向M1型极化且神经功能损伤明显恶化.因此,IRF4表达可能通过调节巨噬细胞极化,抑制促炎细胞因子表达,继而在IS中发挥抗炎和脑保护作用.