加味芎蝎散含药血清对哮喘小鼠巨噬细胞表型及气道重塑蛋白表达的影响

目的 观察加味芎蝎散含药血清对哮喘小鼠巨噬细胞活力、M1/M2表型、炎症介质[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-8(IL-8)]mRNA水平及基质金属蛋白酶(MMP9)和Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)蛋白的影响,探讨加味芎蝎散调控巨噬细胞极化,进而探讨其对Th1/Th2免疫平衡、组织重塑的相关机制.方法 建立哮喘小鼠模型并分离提取肺巨噬细胞,同时制备加味芎蝎散含药血清.设立空白组、模型组及加味芎蝎散含药血清高剂量组、低剂量组,根据分组给予相应处理措施.干预24 h后,细胞增殖和毒性法检测细胞活力,免疫荧光法(IF)检测细胞M1标志物iNOS、M2标志物CD206的表达,荧光定量PCR法检测炎症因子TNF-α、IL-2、IL-4、IL-8的mRNA水平,免疫印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP9)和Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)的蛋白变化.结果 与正常组比较,模型组巨噬细胞活力增加,iNOS/CD206比例下调,TNF-α、IL-8水平增高,IL-4减低,MMP9和Collagen Ⅰ蛋白表达增多,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,加味芎蝎散含药血清高、低剂量组巨噬细胞活力减低,iNOS/CD206比例上调,TNF-α、IL-8水平减低,IL-4升高,MMP9和Collagen I蛋白表达下调,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 加味芎蝎散含药血清可减弱巨噬细胞M2表型极化,调节TH1/TH2免疫平衡,抑制气道重塑蛋白表达.