利用CRISPR/Cas9技术创建拟南芥AtDGK5基因的缺失表达突变体研究
Journal of Agricultural University of Hebei（2023）
Abstract
为探究拟南芥AtDGK5 基因的功能,本研究构建了CRISPR/Cas9 系统靶标AtDGK5 基因保守序列的重组质粒,利用农杆菌介导的花序浸染法分别转化野生型拟南芥和T-DNA插入AtDGKs基因的atdgk347 三突变体中,并通过PCR、酶切和测序鉴定,获得 3 株不同位点编辑的atdgk5 单突和 1 株atdgk3457 四重突变体.表型检测显示,atdgk5 的生长与野生型无明显差异(P＞0.05),但其种子在干旱或盐胁迫下萌发与野生型拟南芥有显著差异(P＜0.05),并且对ABA胁迫不敏感,暗示AtDGK5 对于拟南芥在应答干旱和盐胁迫时发挥重要作用;而atdgk3457 四重突变体的幼苗生长受到显著抑制,表明AtDGKs家族的基因参与了植物的生长发育过程,且不同成员间可能功能互补.上述试验结果为深入研究AtDGKs家族基因的功能提供了材料和基础.
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