温肺化纤颗粒抗小鼠特发性肺纤维化的代谢组学分析

目的:探讨硫酸博莱霉素(BLM)诱导肺纤维化形成不同阶段和给药小鼠血清中差异代谢物的变化,以及温肺化纤颗粒抗特发性肺纤维化的作用机制.方法:小鼠随机分为空白组、14 d空白组、模型组、14 d模型组及温肺化纤颗粒低、高剂量组.模型组、14 d模型组和温肺化纤颗粒低、高剂量组气管注入BLM(0.04U/只)造模,空白组和14 d空白组气管注入等量无菌生理盐水;温肺化纤颗粒低、高剂量组气管注入BLM次日起每天分别灌胃给予不同剂量温肺化纤颗粒,空白组、14 d空白组、模型组和14 d模型组每天灌胃给予等量无菌水;14 d空白组和14 d模型组小鼠气管注入BLM后14 d取外周血制备血清,其余各组小鼠连续给药28d后取外周血制备血清并取材.采集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞分类计数;小鼠肺组织进行病理学检测及羟脯氨酸(HYP)含量测定;采用超高效液相色谱-质谱法(UHPLC-MS)分析各组小鼠血清样本小分子代谢产物,通过主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等筛选差异代谢物并进行代谢通路分析.结果:与空白组比较,模型组小鼠肺组织出现大量连续纤维化病灶,肺泡炎评分、纤维化程度评分及HYP含量显著上升(P＜0.01),BALF中白细胞总数、巨噬细胞总数和淋巴细胞总数明显上升(P＜0.05).14 d模型组较14 d空白组共筛选出33个差异代谢物,以脂质代谢物为主,主要涉及氧化损伤和炎症过程;模型组较空白组共筛选出34个差异代谢物,以氨基酸代谢物为主,主要涉及核酸损伤和炎症过程.与模型组比较,温肺化纤颗粒高剂量组小鼠肺组织的HYP含量、纤维化评分及肺泡炎评分明显下降(P＜0.05,P＜0.01),BALF中淋巴细胞总数明显下降(P＜0.05);与模型组比较,温肺化纤颗粒高、低剂量组分别筛选出40、27个差异代谢物;温肺化纤颗粒低、高剂量组各自与模型组的共有差异代谢物共计9个,主要涉及炎症相关脂质、精氨酸和色氨酸代谢途径,在温肺化纤颗粒低、高剂量组中的变化趋势较模型组均明显回调.结论:温肺化纤颗粒可减轻BLM所致的小鼠肺纤维化,减少胶原沉积和炎症反应,其抗纤维化作用可能与影响炎症因子、一氧化氮及氧化应激相关代谢通路有关.