FOXM1与CENP-A在骨肉瘤化疗耐药中的关系及其作用机制

目的 探讨CENP-A是否参与骨肉瘤细胞化疗耐药及与叉头框蛋白M1(forkhead box M1,FOXM1)的调控关系.方法 采用Western blot法检测骨肉瘤亲本细胞(HOS、U2OS)、顺铂耐药细胞(HOS/R、U2OS/R)和稳定FOXM1 过表达细胞(HOS/FOXM1、U2OS/FOXM1)中CENP-A蛋白表达.转染siRNA后检测CENP-A蛋白表达;运用CCK-8 细胞增殖实验观察siRNA敲低CENP-A后耐药骨肉瘤细胞对顺铂敏感性的影响;FOXM1 抑制剂RCM1 处理后检测CENP-A蛋白表达.Kaplan-Meier法分析GEPIA数据库中CENP-A表达与患者预后的关系,Spearman相关性分析CENP-A和FOXM1 两者之间的关系.结果 骨肉瘤顺铂耐药细胞中CENP-A蛋白表达比亲本细胞明显升高(0.52±0.03 vs 0.92±0.01,0.33±0.02 vs 1.12±0.01),FOXM1过表达细胞中CENP-A表达较空载体对照亦明显增高;在骨肉瘤顺铂耐药和FOXM1 过表达细胞中转染siRNA-CENP-A后,CENP-A蛋白表达均明显降低(0.84±0.01 vs 0.60±0.02,0.98±0.01 vs 0.41±0.01).转染siRNA敲低CENP-A后,骨肉瘤耐药细胞和FOXM1 过表达细胞对顺铂的耐药性明显降低.10 μmol/L RCM1 FOXM1 抑制剂处理耐药细胞和FOXM1 过表达细胞后,CENP-A蛋白表达均明显下降.生物信息学分析发现CENP-A高表达组患者总生存期显著低于低表达组(P＜0.01).Spearman相关性分析发现CENP-A和FOXM1 表达呈正相关(r =0.79).结论 FOXM1 可能通过调控CENP-A参与骨肉瘤化疗耐药,为骨肉瘤化疗耐药治疗策略提供新的理论基础.