母胎界面调节性T细胞的来源初步探索

目的 探索母胎界面调节性T(regulatory T cells,Treg)细胞的来源及机制.方法 收集不同孕期(妊娠第0天为E0,以此类推E4.5、E7.5、E10.5、E13.5、E16.5、E19.5)小鼠的胸腺、外周血、脾脏、淋巴结和蜕膜,利用流式细胞术检测各组织中CD4+Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的比例.实时荧光定量聚合酶链反应(real?time quantitative polymerase chain reaction,RT?PCR)和Western blot检测未孕及孕鼠E13.5的子宫蜕膜组织中趋化因子CCL2、CCL7、CCL12及CCL20在mRNA和蛋白的表达水平.流式检测未孕及E13.5孕鼠外周血中Treg细胞表面趋化因子受体CCR2和CCR6的表达.趋化实验检测CCL2、CCL7、CCL12及CCL20对E13.5孕鼠的脾脏中Treg细胞的趋化作用.结果 同/异基因配对组孕鼠胸腺的Treg细胞在E10.5和E13.5较未孕组增多,但两者之间无差异;而异基因配对组孕鼠蜕膜的Treg细胞占CD4+T细胞的比例都明显高于同基因配对组,在E10.5达到高峰,并都高于未孕组.而同/异基因配对E13.5两组孕鼠子宫蜕膜中CCL2、CCL12、CCL20的mRNA和蛋白表达水平较未孕组均明显升高,且异基因配对E13.5组明显高于同基因配对E13.5组;而CCL7在mRNA水平的表达升高但在蛋白水平无差异.同/异基因配对E13.5组孕鼠外周血中Treg细胞表面CCR2和CCR6的表达较未孕组均显著升高;CCL2、CCL7、CCL12、CCL20均对妊娠期Treg细胞有明显的趋化作用.结论 母胎界面的Treg细胞可能主要来源于胸腺,并可通过趋化作用到达蜕膜.