瑞香狼毒提取物抗乳腺癌MCF-7细胞多药耐药的研究

该研究将探索瑞香狼毒提取物(SCE)抗乳腺癌多药耐药的作用及相关机制.以乳腺癌化疗敏感细胞株MCF-7及阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADR作为实验对象,通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力,采用Pi单染法测定细胞周期,4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色、流式细胞术检测细胞凋亡情况,单丹磺酰尸胺(MDC)染色以及GFP-LC3B-mcherry腺病毒转染检测自噬流情况,Western blot检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax、caspase-9、caspase-3以及自噬蛋白LC3B、p62、Beclin-1的表达水平.实验结果显示,SCE能够显著抑制乳腺癌细胞敏感/耐药株的增殖,耐药因子为0.53,远低于阿霉素的耐药因子59,同时SCE处理后敏感/耐药细胞株的G0/G1期细胞比例均显著增加.另外,SCE给药后的DAPI染色表明,敏感/耐药细胞株均出现核浓缩、染色加深、核碎裂等一系列凋亡现象;流式双染结果表明SCE给药后敏感/耐药细胞株凋亡细胞比例均显著上升;Western blot结果显示SCE给药后敏感/耐药细胞株caspase-3、caspase-9、Bcl-2蛋白的表达水平均显著降低而Bax蛋白的表达水平显著升高.进一步,SCE处理后也能够使乳腺癌耐药株MDC阳性染色以及GFP-LC3B-mcherry转染后的黄色荧光斑点增多,并上调乳腺癌细胞自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ、p62以及Beclin-1的表达水平.综上所述,SCE可能通过阻滞乳腺癌耐药细胞的细胞周期,并阻断自噬流,最终通过干预耐药细胞的凋亡抵抗而发挥抗耐药作用.