基于PP2A与GSK-3β探讨丹栀逍遥散对阿尔茨海默病模型大鼠tau蛋白磷酸化水平的作用机制

目的:研究丹栀逍遥散对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马中tau蛋白磷酸化水平与糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、磷酸丝氨酰/磷酸苏安酰蛋白磷酸酶2A(PP2A)不同位点的影响及作用机制.方法:选用90只SPF级Wistar雄性大鼠,用双侧海马区注射冈田酸的方式建立AD大鼠模型.筛选出造模成功的大鼠,随机分为模型组,安理申组(0.5 mg·kg-1),丹栀逍遥散高、中、低剂量组(17.55、8.77、4.38 g·kg-1),连续灌胃42d,1次/d.Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,尼氏染色观察海马区神经元形态结构,实时荧光定量聚合链式反应(Real-time PCR)检测tau蛋白、GSK-3β、PP2A mRNA表达情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测tau蛋白、GSK-3β、PP2A及相关蛋白的表达.结果:与空白组比较,模型组大鼠学习记忆能力显著降低(P＜0.01),海马CA3区细胞结构异常,排列杂乱,数量减少,GSK-3β mRNA、GSK-3β、p-GSK-3β-Tyr216、p-PP2A、p-tau表达均显著增高(P＜0.01),p-GSK-3β-Ser9、PP2A的表达量显著减少(P＜0.01).与模型组比较,安理申组及丹栀逍遥散各组学习记忆能力均改善(P＜0.05,P＜0.01),海马CA3区细胞形态及数量优于模型组;安理申组PP2A、taumRNA明显上调(P＜0.05),GSK-3βmRNA显著下调(P＜0.01),GSK-3β、p-GSK-3β-Tyr216、p-PP2A蛋白表达明显下调(P＜0.05,P＜0.01),PP2A蛋白表达显著上调(P＜0.01);丹栀逍遥散高剂量组PP2A mRNA显著上调(P＜0.01),GSK-3β mRNA显著下调(P＜0.01),p-PP2A、p-GSK-3β-Tyr216、p-tau蛋白表达下调(P＜0.05,P＜0.01),PP2A蛋白表达显著上调(P＜0.01);丹栀逍遥散中剂量组GSK-3βmRNA显著下调(P＜0.01),GSK-3β、p-GSK-3β-Tyr216、p-tau蛋白表达下调(P＜0.05,P＜0.01),PP2A蛋白表达显著上调(P＜0.01);丹栀逍遥散低剂量组 PP2A mRNA 显著上调(P＜0.01),GSK-3βmRNA 显著下调(P＜0.01),GSK-3β、p-GSK-3β-Tyr216 蛋白表达下调(P＜0.05,P＜0.01),p-GSK-3β-Ser9、PP2A蛋白表达显著上调(P＜0.01).结论:丹栀逍遥散可改善AD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与调控GSK-3β与PP2A蛋白相关位点活性及tau蛋白磷酸化水平有关.