过表达HDAC6基因的Vero细胞系建立及其对狂犬病病毒增殖效率评价
Chinese Veterinary Science（2023）
摘要
为提高狂犬病病毒(rabies virus,RABV)在细胞中的增殖效率,本研究利用慢病毒包装系统构建组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylase 6,HDAC6)过表达的Vero/HDAC6细胞系,分析RABV在Vero/HDAC6细胞系与Vero细胞中的复制差异.首先以非洲绿猴HDAC6基因为目标构建重组质粒plv-SV40-puro-3×flag-HDAC6,并与辅助质粒pMD2.G和psPAX2共转染至HEK-293T细胞进行慢病毒包装.将包装好的慢病毒感染Vero细胞并通过嘌吟霉素筛选获得过表达HDAC6基因的阳性细胞.利用TCID50和Western-blot技术检测RABV在Vero/HDAC6细胞系中的复制能力.结果表明,过表达HDAC6能够明显促进RABV复制,并且RABV在Vero/HDAC6细胞系中的增殖能力高于野生型细胞.本研究构建的Vero/HDAC6细胞系能显著促进RABV的增殖,为RABV疫苗候选细胞株奠定了基础.
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