硒对铅致小鼠睾丸间质细胞凋亡的影响

China Animal Husbandry & Veterinary Medicine(2023)

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摘要
[目的]探究硒对铅致小鼠睾丸间质细胞凋亡的影响.[方法]以小鼠睾丸间质细胞为研究对象,分为对照组、硒组、铅组和硒+铅组:硒组在细胞培养液中添加2 μmol/L亚硒酸钠;铅组在细胞培养液中添加40 μmol/L醋酸铅;硒+铅组在细胞培养液中联合添加2 μmol/L亚硒酸钠+40 μmol/L醋酸铅,体外培养24 h.采用MTT法检测细胞增殖情况;检测细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;使用化学荧光法测定活性氧(ROS)水平;运用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测凋亡相关基因天冬氨酸半胱氨酸酶-3(Caspase3)、Caspase8、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的mRNA和蛋白表达水平.[结果]与对照组相比,铅组细胞增殖显著受到抑制(P<0.05),MDA含量和ROS水平显著上升(P<0.05),SOD和GSH-Px活性显著下降(P<0.05),同时,铅显著上调了 Caspase3、Caspase8、Bax的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),显著下调了 Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05);硒组小鼠睾丸间质细胞增殖活性显著提高(P<0.05).与铅组相比,硒+铅组细胞中MDA含量和ROS水平显著下降(P<0.05),SO)D和GSH-Px活性显著升高(P<0.05),且介于对照组和铅组之间;Caspase3、Caspase8、Bax的mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05),Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平则显著上升(P<0.05),均介于铅组和对照组之间.[结论]铅能抑制小鼠睾丸间质细胞增殖活力,诱导细胞氧化应激和凋亡;补充适量硒可以促进细胞增殖,且通过提高抗氧化酶活性缓解铅造成的细胞氧化应激和凋亡.
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关键词
selenium,lead,mouse,Leydig cells,apoptosis
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