人脐带间充质干细胞来源的细胞外囊泡增强纤维化肝脏再生能力

目的 探讨人脐带间充质干细胞来源的细胞外囊泡(hUC-MSC-EV)在纤维化肝脏再生中的作用.方法 将C57BL/6小鼠随机分为正常肝脏70％肝切除组(Oil+PHx组)、肝纤维化70％肝切除组(CCl4+PHx组)、肝纤维化70％肝切除+间充质干细胞来源的细胞外囊泡(MSC-EV)治疗组(CCl4+PHx+MSC-EV组),每组8只.将LX-2细胞分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、转化生长因子(TGF)-β组、TGF-β+MSC-EV组.检测各组小鼠肝部分切除术后丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,分析各组小鼠肝组织纤维化及增殖相关指标的表达情况.检测各组LX-2细胞表皮细胞生长因子(EGF)、成纤维母细胞生长因子(FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)信使RNA(mRNA)的表达水平.观察对小鼠肝脏HGF表达的影响.结果 与Oil+PHx组比较,CCl4+PHx组小鼠血清AST、ALT、LDH水平升高,纤维化程度较高,天狼星红及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)染色阳性区域面积增大,α-SMA蛋白表达水平升高;与CCl4+PHx组比较,CCl4+PHx+MSC-EV组小鼠血清AST、ALT、LDH水平下降,纤维化程度较轻,天狼星红及α-SMA染色阳性区域面积缩小,α-SMA蛋白表达水平下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与Oil+PHx组比较,CCl4+PHx组Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达水平降低;与CCl4+PHx组比较,CCl4+PHx+MSC-EV组Ki67、PCNA蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与PBS组比较,TGF-β组LX-2细胞内CollagenⅠmRNA表达水平升高,α-SMA蛋白表达水平升高,HGF蛋白表达水平下降;与TGF-β组比较,TGF-β+MSC-EV组LX-2细胞内CollagenⅠmRNA表达水平下降,HGF mRNA和蛋白表达水平升高,α-SMA蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05).CCl4+PHx组HGF蛋白表达水平较Oil+PHx组下降,但差异无统计学意义(P>0.05);CCl4+PHx+MSC-EV组HGF蛋白表达水平较CCl4+PHx组上升,差异有统计学意义(P<0.05).结论 纤维化肝脏再生能力较正常肝脏减弱,hUC-MSC-EV可以减轻肝纤维化,并可能通过促进活化的肝星状细胞分泌HGF,有效改善纤维化肝脏的肝再生能力.