单增李斯特菌sRNA00111缺失株构建及对细菌部分生物表型的影响
Progress in Veterinary Medicine（2023）
摘要
为了研究sRNA00111对单增李斯特菌的毒力、抗应激能力及生物被膜形成等方面的影响,采用同源重组技术,融合目的基因同源臂构建载体后,在高温和氯霉素条件下连续传代筛选缺失株.分析标准株和缺失株在环境应激反应、毒力及生物被膜方面的影响.结果显示,成功构建基因缺失菌株LM-ΔsRNA00111;与标准株相比,缺失株LM-ΔsRNA00111在不同温度环境下生长曲线无明显差异,表明sRNA00111基因表达不受温度影响;在pH为5.5和9.5的环境下培养,缺失株生长速度均低于标准株,表明该基因在酸性和碱性环境应激中对菌体生长有减缓作用.生物被膜试验表明缺失株形成能力略高于标准株.黏附和侵袭试验可知,缺失株对于Caco-2细胞的侵袭能力明显低于标准株.对靶基因分析,sRNA00111参与并调控了碳代谢和毒力代谢相关的靶基因.综上表明,sRNA00111基因在应激环境条件下,对单增李斯特菌的碳代谢及毒力具有重要的调控作用.
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