纳米雄黄酸飞品对人乳腺癌细胞增殖、凋亡及自噬的影响

目的 探讨纳米雄黄酸飞品(Acid Cleaning-Realgar Nanoparticles,NRPP)对人乳腺癌细胞增殖、凋亡及对自噬的影响,并初步研究其可能作用机制.方法 采用CCK-8法检测不同浓度(0、10、20、40、60、80、100、120 μg·mL-1)和不同干预时间(12、24、48 h)的NRPP对人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435S细胞增殖的影响;荧光显微镜观察MDA-MB-435S细胞形态变化;Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡现象;透射电子显微镜(TEM)观察细胞超微结构变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测凋亡(Bcl-2和PARP)、自噬(LC3和p62)及自噬通路相关蛋白的表达水平.结果 NRPP对上述3种乳腺癌细胞的增殖均有显著的抑制作用,且呈现一定的浓度和时间依赖性.在荧光显微镜下观察,随着NRPP浓度的增大,细胞数量减少,细胞间隙增大,细胞逐渐皱缩、变圆、脱落,未见凋亡小体.TEM下观察,对照组细胞的细胞器状态良好,NRPP组有明显的自噬体.Western blot结果显示Bcl-2和PARP表达量未发生明显的趋势变化;LC3Ⅱ/Ⅰ表达上调,p62表达下调,并呈一定的浓度和时间依赖性;PI3K/Akt/mTOR自噬通路蛋白表达量未发生明显的趋势变化;COXIV表达下调,并呈浓度依赖性.结论 NRPP可抑制3种乳腺癌细胞的增殖,且可能通过线粒体自噬诱导MDA-MB-435S细胞死亡.