小鼠视神经损伤后的视功能评估

目的 通过闪光-视网膜电图(f-ERG)和视动反应(OMR)评估小鼠视神经钳夹(ONC)损伤后视功能的变化.方法 30只6～8周龄健康雄性C57BL/6J小鼠,按照随机数字表法分为正常对照(NC)组、ONC 3 d组、ONC 5 d组、ONC 7 d组以及ONC 14 d组,每组小鼠各6只.NC组不做特殊处理,ONC组小鼠在同一天进行双眼ONC 10 s造模.在相应时间点进行f-ERG和OMR检查,然后处死小鼠取视网膜进行视网膜免疫荧光染色铺片实验,观察各组小鼠视网膜神经节细胞(RGC)存活率的变化.比较NC组与ONC 3 d组、ONC 5 d组、ONC 7 d组以及ONC 14 d组小鼠在不同光刺激强度下f-ERG的a波与b波波幅变化,以及随着视神经损伤时间延长,OMR测得的小鼠视力变化,评估小鼠视神经损伤后的视功能.结果 与NC组相比,ONC 3 d组、ONC 5 d组、ONC 7 d组以及ONC 14 d组小鼠RGC存活率均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05).NC组、ONC 3 d组、ONC 5 d组、ONC 7 d组以及ONC 14 d组小鼠f-ERG的a波与b波波幅均随光刺激强度增大而升高.在光刺激强度为0.1 cds·m-2、0.3 cds·m-2、1.0 cds·m-2、3.0 cds·m-2时,ONC各组小鼠a波与b波波幅均呈波动性下降;在光刺激强度为10.0 cds·m-2时,ONC各组小鼠a波与b波波幅随ONC时间延长而持续下降.与NC组相比,在0.3 cds·m-2、1.0 cds·m-2、3.0 cds·m-2、10.0 cds·m-2光刺激强度下,ONC 3 d组、ONC 5 d组、ONC 7 d组以及ONC 14 d组小鼠a波与b波波幅均显著下降(均为P<0.05);在光刺激强度为0.1 cds·m-2时,ONC 5 d组小鼠a波与b波、ONC 7 d组和ONC 14 d小鼠b波波幅也显著下降(均为P<0.05).OMR记录的视锐度,随着ONC时间延长而逐渐下降,并在短期内(14 d)丧失.在ONC 14 d组,小鼠RGC存活率降低至不足10％,各光刺激强度下小鼠a波与b波波幅降低,小鼠OMR也完全丧失,小鼠RGC存活率、波幅、视锐度具有较好的一致性.结论 小鼠视神经损伤后,RGC存活率与视功能迅速下降.OMR和f-ERG的联合运用,可作为评估小鼠视神经损伤后视功能变化的有效手段.