基于定向标记抗体的虾原肌球蛋白量子点免疫层析方法的建立及应用

目的 利用量子点定向标记的单克隆抗体,建立竞争荧光免疫层析方法快速检测食品中虾原肌球蛋白(tropomyosin,TM).方法 使用杂交瘤细胞株免疫Balb/c小鼠,从小鼠腹水中制备得到单克隆抗体,将氨基化量子点通过具有抗体Fc端生物亲和性的重组蛋白共价固定于抗体Fc端.以量子点定向标记抗体作为检测抗体,以南美白对虾中的TM作为检测靶标,基于竞争法原理组装免疫层析试纸条.在对条件参数进行优化后,应用于市售食物样品中TM的检测.结果 所建立方法的灵敏度为0.96μg/mL(％P=50％),检出限为0.15μg/mL(％P=20％),检测结果与文献中报道的相当.试纸条批内差和批间差的变异系数分别为6.81％～8.86％和8.27％～14.67％,均小于15％,在可接受范围之内.同时试纸条显示出了良好的特异性与准确性,实际样品的检测结果与过敏原标签一致.结论 本研究所建立的荧光免疫层析试纸条检测方法适用于TM的快速、高效检测.