硫化氢合成酶在糖尿病模型小鼠结肠动力障碍中的作用机制

目的 探讨硫化氢(H2S)合成酶在链脲佐菌素(STZ)诱导的雄性C57BL/6糖尿病模型小鼠结肠动力障碍中的作用.方法 将16只SPF级小鼠随机分为STZ组和对照组,每组各8只.再将10只SPF级小鼠随机分为正常组和河豚毒素(TTX)组,每组各5只.STZ组一次性腹腔注射STZ(200 mg/kg)诱导1型糖尿病模型,对照组腹腔注射等体积枸橼酸缓冲液.正常组和TTX组不做任何处理.采用免疫荧光检测H2 S合成酶[胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和胱硫醚-β-合成酶(CBS)]在STZ组和对照组小鼠结肠的分布;采用Western blot检测两组小鼠结肠组织中CBS和CSE的表达水平;通过恒温浴槽实验观察4组小鼠结肠平滑肌收缩改变;通过膜片钳实验观察不同浓度外源性H2S对正常组小鼠平滑肌细胞L型钙通道电流的影响.结果 STZ组小鼠STZ注射后第2周与第4周空腹血糖水平均显著高于同期对照组,排便粒数均显著低于同组注射前及同期对照组(P<0.001).STZ组小鼠LMS和CMS收缩振幅均低于对照组(P<0.05).STZ组小鼠结肠组织CBS和CSE表达水平均高于对照组(P<0.05).低浓度H2S供体硫氢化钠(NaHS,0.10 mmol/L)促进小鼠结肠平滑肌收缩,而高浓度NaHS(0.50 mmol/L～1.50 mmol/L)抑制其收缩,且TTX不能阻断NaHS对肌条的双向调节作用.正常小鼠NaHS(0.10 mmol/L)组电流密度高于NaHS(0.50 mmol/L)组及基线值(P<0.05).结论 糖尿病模型小鼠结肠动力障碍可能与肠道组织H2S合成增加进而抑制平滑肌细胞L型钙通道开放有关.