lncRNA CTD-2196 E14.5通过海绵吸附miR-744-5p抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭

目的:探讨CTD-2196E14.5通过调控miR-744-5p表达对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响.方法:通过检索TCGA数据库分析膀胱癌组织及癌旁组织中CTD-2196E14.5的表达水平及其与膀胱癌患者总生存期的关系.采用荧光实时定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测膀胱癌细胞株MGH-U3、T24、253J、J82和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中CTD-2196E14.5的表达水平.采用脂质体介导技术将pcDNA-CTD-2196E14.5质粒、pcDNA空载质粒分别转染253J细胞,即CTD-2196E14.5组和NC组.采用MTT法、流式细胞术和Transwell实验检测CTD-2196E14.5对膀胱癌253J细胞增殖、细胞周期和侵袭的影响.应用lncRNA2function软件预测和双荧光素酶报告基因实验验证CTD-2196E14.5与miR-744-5p的靶向关系.qPCR检测miR-744-5p的表达.Western blotting检测AMPK信号通路蛋白和细胞周期蛋白的表达.结果:CTD-2196E14.5在膀胱癌组织中低表达(P<0.01),CTD-2196E14.5表达较高的患者总生存期较长(P<0.01).CTD-2196E14.5在膀胱癌细胞株MGH-U3、T24、253J、J82中低表达(P<0.05),在253J细胞中表达水平最低(P<0.01).与NC组相比,过表达CTD-2196E14.5抑制253J细胞的增殖能力(P<0.05)、细胞周期进展(P<0.01)和侵袭能力(P<0.01).lncRNA2function软件显示,miR-744-5p可能是CTD-2196E14.5的靶基因.双荧光素酶报告基因实验结果显示,CTD-2196E14.5互补结合miR-744-5p(P<0.01).与NC组相比,过表达CTD-2196E14.5负调控miR-744-5p的表达水平(P<0.01).与NC组相比,过表达CTD-2196E14.5的253J细胞中AMPK信号通路蛋白p-AMPKα、p-AMPKβ1、p-TSC2、HNF4α、p-mTOR及细胞周期蛋白CDK4、Cyclin D1表达明显降低.结论:CTD-2196E14.5在膀胱癌组织和细胞中表达显著降低,其通过海绵吸附miR-744-5p下调AMPK信号通路蛋白及细胞周期蛋白的表达水平,抑制膀胱癌细胞253J的增殖和侵袭.