蠲痹颗粒醇提物调控MAPK信号转导抑制T细胞活化效应机制的研究

目的 探讨蠲痹颗粒醇提物(JBKL)在丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号转导通路中抑制T细胞活化的效应机制,揭示扶阳学派应用扶阳理论治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的现代免疫学机制.方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测JBKL对伴刀豆球蛋白(Con A)、脂多糖(LPS)诱导T、B脾淋巴细胞增殖活性及细胞毒性的影响;建立体外抗CD3单克隆抗体(Anti-CD3 mAb)诱导的T细胞活化模型,MTT检测JBKL对T细胞体外活化增殖的影响,酶联免疫吸附法(ELISA)测定干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-17A(IL-17A)、IL-10和IL-6在细胞上清中的含量;蛋白质印迹法(Western blot)检测体外纯化CD4+T细胞中ERK和p38蛋白的磷酸化水平.结果 JBKL在浓度30 μg/mL时显著抑制Con A、Anti-CD3 mAb和LPS诱导的T细胞和B细胞增殖功能;JBKL在浓度(3～30)μg/mL时对正常脾淋巴细胞无明显的细胞毒性作用,明显下调IFN-γ、IL-17A和促炎因子IL-6的含量,而促进IL-10的分泌;JBKL在浓度100 μg/mL时抑制MAPK信号通路,可降低纯化CD4+T细胞磷酸化ERK和p38蛋白的表达.结论 JBKL阻碍T细胞介导的免疫反应,减少MAPK信号通路磷酸化ERK和p38蛋白表达,可能是其治疗RA的重要分子机制之一.