基于马丁达比犬肾上皮细胞单层模型研究去氢骆驼蓬碱吸收转运特性

目的 研究去氢骆驼蓬碱(harmine,HM)在马丁达比犬肾上皮(Madin Dar-by canine kidney,MDCK)细胞模型上的吸收转运特性.方法 用噻唑蓝比色法考察HM对MDCK细胞的毒性.建立MDCK细胞单层模型,通过检测跨膜电阻以确定细胞单层的完整性和致密性.建立细胞渗透液中HM的高效液相色谱测定方法,考察不同方向、浓度、时间及P-糖蛋白抑制药(维拉帕米、环孢素A)对HM吸收的影响,计算药物累计透过量(cumulative permeation volume,Q)、表观渗透系数(apparent permeability coefficient,Papp)及外排比(efflux ratio,ER).结果 HM在0.93～7.46μg·mL-1内对MDCK细胞无毒性作用.MDCK细胞培养至5 d时电阻值大于600Ω·cm2,表明细胞单层模型建立成功.HM在MDCK细胞单层模型上Q具有浓度和时间依赖性.在低、中、高质量浓度下Papp分别为(1.97±0.09)×10-5,(2.02±0.18)×10-5和(2.31±0.16)×10-5 cm·s-1.双向转运结果显示,低、中、高质量浓度下HM分泌方向的Papp显著大于吸收方向的Papp,ER为2.57.加入P-糖蛋白抑制药后,HM吸收方向的Papp显著增加.结论 HM属于吸收良好的药物,其转运机制以被动吸收为主,同时兼有P-糖蛋白等外排体参与其转运过程.