连翘叶酶-醇提取物抗药物性肝损伤作用研究

[目的]研究连翘叶酶-醇提取物(FLEAE)抗药物性肝损伤(DILI)的作用及其机制.[方法]将48只昆明小鼠随机分为6组,每组8只,分别为正常对照组(NC)、FLEAE对照组(FC)、DILI模型组(DILI)及FLEAE高、中、低剂量治疗组(HFC、MFC、LFC),其中NC组和FC组小鼠腹腔注射生理盐水,其余各组小鼠腹腔注射300 mg/kg APAP注射液,每天2次,连续注射4 d,第5天开始NC组和DILI组小鼠灌胃生理盐水,FC、HFC、MFC和LFC组小鼠分别灌胃FLEAE 600,600,400和200 mg/kg,每天2次,连续灌胃3 d.最后1次灌胃12 h后,检测各组小鼠谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平及氧化应激指标谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)水平,肝组织切片苏木精伊红(HE)染色观察肝损伤情况.用网络药理学方法构建FLEAE调控DILI的靶点集,GO和KEGG分析靶点的基因功能及通路,筛选FLEAE抗DILI的核心靶点.qRT-PCR和Western Blot检测核心靶点PIK3CA及其下游凋亡抑制分子B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)基因和蛋白的表达水平.[结果]FLEAE可显著降低DILI组小鼠血液中的ALT和AST水平,改善药物性肝损伤.FLEAE可显著降低DILI小鼠的GSH和SOD水平,提高H2O2和MDA水平.网络药理学分析表明,FLEAE抗DILI靶点与凋亡过程的负调控、氧化应激等有关,主要富集于PI3K/Akt信号通路,可能通过PIK3CA发挥作用;qRT-PCR和Western Blot结果显示,FLEAE可能通过提高PIK3CA基因和蛋白的表达发挥抗DILI及抑制细胞凋亡的作用.[结论]FLEAE通过上调DILI中PIK3CA的表达抑制细胞凋亡和改善氧化应激,发挥抗DILI的作用.