铜绿假单胞菌QS系统调控基因和毒力基因的携带、表达及与耐药的相关性

目的 探究临床分离铜绿假单胞菌常见群体感应(QS)系统调控基因和毒力基因的携带和表达情况及与耐药的相关性.方法 收集检验科各类临床标本中分离出的铜绿假单胞菌97株,应用vitek2-compact仪器法及标准纸片扩散法检测抗菌药物的耐药性,运用聚合酶链式反应(PCR)方法检测4种QS系统调控基因及7种毒力基因的携带情况,对结果做统计学分析;荧光定量PCR(qRT-PCR)检测调控基因LasI、Rh1 R和毒力基因exoS、PCN的表达情况,对两类基因的相对表达量进行线性分析.结果 97株分离株对11种抗菌药物的耐药率:妥布霉素、庆大霉素、阿米卡星的耐药率小于10％且阿米卡星最低为2.06％,对其余药物耐药率均在11％以上,最高的为亚胺培南25.77％,43株为多重耐药菌株,且呼吸系统来源的菌株对抗菌药物耐药性更高.PCR基因检测结果显示:4种QS系统调控基因LasI、LasR、Rh1I、Rh1R检出率均为100％;7种毒力基因检出率最高的为exoT 98.97％(96/97),最低的为exoU 13.40％(13/97),PCN 43.30％(42/97),其余毒力基因检出率皆在86％以上.未携带毒力基因的菌株对头孢他啶等6种抗菌药物耐药,携带有7种毒力基因的菌株对头孢他啶耐药.PCN、exoS、exoU阳性菌株中,非多重耐药铜绿假单胞菌(NMDR-PA)所占比例更高;PCN+菌株对哌拉西林/他唑巴坦耐药率更高且差异有统计学意义;与exoS+/exoU-菌株相比,exoS-/exoU+菌株耐药的抗菌药物种类明显下降.NMDR-PA中调控基因rh1 R、LasI的相对表达量更高且LasI的差异有统计学意义;调控基因rh1 R与毒力基因exoS、调控基因LasI与毒力基因PCN之间的表达呈正向线性关系.结论 铜绿假单胞菌耐药现象仍较严重且表现多重耐药,调控基因稳定存在于菌株中,除exoU、PCN外,其余毒力基因exoS、exoT、exoY、ToxA、LasB携带率均较高,调控基因rh1 R、LasI能正向调节毒力基因的表达,QS系统调控基因与毒力基因均会影响铜绿假单胞菌的耐药性.