防己黄芪消肿方调控滑膜巨噬细胞极化治疗膝骨关节炎滑膜炎

目的:观察防己黄芪消肿方(FHDP)对Hulth法膝骨关节炎(KOA)大鼠关节滑膜巨噬细胞极化情况及滑膜炎情况的干预作用.方法:36只大鼠随机分为6组,分别为假手术组、模型组、FHDP高、中、低剂量组(29.16、14.58、7.29 g·kg-1)及洛索洛芬钠组(16.2mg·kg-1).采用改良Hulth法造KOA大鼠模型.术后6周根据分组给予高、中、低3个剂量的FHDP药液、生理盐水(NS)及洛索洛芬钠药液进行干预,给药2周后处死动物.苏木素-伊红(HE)染色后观察滑膜及软骨的组织病理学改变,流式细胞术(FCM)及免疫荧光(IF)评估M1/M2巨噬细胞极化情况,分别采用免疫组织化学(IHC)及酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测关节组织和血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、金属基质蛋白酶-13(MMP-13)等巨噬细胞极化相关蛋白的表达水平.结果:与假手术组比较,模型组Krenn及Mankin评分显著增高(P＜0.01);与模型组比较,各给药组均能降低Krenn评分(P＜0.05,P＜0.01),Mankin评分差异无统计学意义.与假手术组比较,模型组M1/m?(CD38+)显著升高(P＜0.01),M2/m?(CD206+)降低(P＜0.05);与模型组比较,FHDP高、中、低剂量组可降低M1/m?(P＜0.05,P＜0.01),各给药组均提高M2/m?,但差异无统计学意义.与假手术组比较,模型组M1/M2显著升高(P＜0.01);与模型组比较,各FHDP剂量组M1/M2均显著降低(P＜0.01),FHDP高、中剂量组较洛索洛芬钠组M1/M2更低(P＜0.05).与假手术组比较,模型组滑膜及软骨中TNF-α、IL-1β、MMP-13的水平显著增高(P＜0.01),IL-10的水平显著降低(P＜0.01);与模型组比较,各给药组均能降低滑膜中TNF-α、IL-1β水平(P＜0.05),对滑膜中MMP-13及IL-10的水平影响差异无统计学意义,各给药组均未能影响软骨中各炎症介质的水平.与假手术组比较,模型组血清TNF-α、IL-β水平显著升高(P＜0.01),IL-10水平降低(P＜0.05);与模型组比较,FHDP高剂量组可降低TNF-α水平(P＜0.05),各给药组均能升高IL-10水平(P＜0.05,P＜0.01),各给药组IL-β的水平差异无统计学意义.结论:防己黄芪消肿方可改善KOA大鼠关节滑膜炎,可通过抑制M1巨噬细胞极化影响促炎细胞因子及金属基质蛋白酶的分泌,对M2巨噬细胞极化无明显影响作用,调控巨噬细胞极化失衡是该方缓解滑膜炎症治疗KOA的可能机制.