甲状腺癌细胞中分化相关蛋白的筛选分析

目的 检测正常甲状腺细胞系、中分化甲状腺癌细胞系和低分化甲状腺癌细胞系蛋白质表达谱,寻找与甲状腺癌分化相关的生物标志物.方法 应用液相色谱(liquid chromatogram,LC)与质谱(Mass Spectrum,MS)联用分析方法,找出正常甲状腺细胞与中、低分化甲状腺癌细胞系间的差异蛋白.利用生物信息学方法对差异蛋白进行分析,并利用Western blot检测THJ-16T、FTC133、Nthy-ori3-1等3个细胞系中I型胶原α1(collagen type Iα1,COL1A1)、I型胶原α2(collagen type Iα2,COL1A2)、内凹陷蛋白(caveolin-1,Cav-1)、纤维束蛋白同源物1(fascin 1,FSCN1)、硫氧化还原蛋白(thioredoxin,TRX)、高迁移率族蛋白A1(high mobility group protein A1,HMGA1)、超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase,SOD2)、Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1(Rho-associated protein kinase 1,Rock-1)、角蛋白7(cytoskeletal 7,KRT7)、角蛋白8(cytoskeletal 8,KRT8)的表达,利用免疫细胞化学方法进一步验证,从而筛选出分化相关蛋白.结果 通过分析获得中分化与低分化甲状腺癌细胞细胞系差异表达蛋白质178个.生物信息学研究表明,这些差异蛋白质主要参与细胞內吞信号、T-淋巴细胞介导的细胞凋亡、维生素C运输等通路,且通过Western blot检测发现COL1A1、Cav-1、TRX、Rock-1的表达与细胞的分化能力呈正相关,部分蛋白表达水平使用免疫细胞化学验证,与Western blot结果相符.结论 COL1A1、Cav-1、TRX、Rock-1可能是分化相关的标记物,此为进行大样本的临床检测提供了线索.