猫杯状病毒、猫细小病毒、猫流感病毒和猫疱疹病毒多重PCR检测方法的建立和应用

为建立快速检测猫科动物重要传染病的多重PCR检测方法,根据GenBank中登录的猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)、猫细小病毒(feline parvovirus,FPV)、猫流感病毒(feline influenza virus,FIV)和猫疱疹病毒 1 型(feline herpesvirus type 1,FHV-1)的相对高保守性基因ORF2、NSP1、M和UL27,分别设计4对特异性引物.通过对反应体系的摸索及优化,建立了可同时扩增FCV(257 bp)、FPV(380 bp)、FIV(519 bp)和FHV-1(761bp)的四重PCR反应条件及体系.结果显示:能够在同一体系中用同一反应扩增出以上4种病毒基因,其重复性及特异性均良好,敏感性可达到10copies/μL.用该方法检测69份口鼻拭子,结果发现FCV和FPV混合感染的阳性率为10.14％,FCV和FHV-1混合感染的阳性率为1.45％,FCV、FPV和FIV混合感染的阳性率为10.14％.结果表明:研究建立的四重PCR检测方法可对常见猫科动物病毒性传染病进行快速准确的鉴别诊断,而且为早期治疗提供了有力的检测工具.