微小RNA-155-5p通过激活转化生长因子-β/Smad通路促进尿道上皮细胞的炎症和纤维化反应

目的:观察尿道上皮细胞中微小RNA(miR)-155-5p对转化生长因子-β(TGF-β)/Smad信号通路的影响，从而参与创伤性尿道狭窄炎症和纤维化的调节。方法:将miR-155-5p mimics及miR-155-5p inhibitor转染到尿道上皮细胞SV-HUC-1中，转染24 h后使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测SV-HUC-1细胞中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，白细胞介素(IL)-1β和IL-6的水平。qPCR和蛋白印记分别检测血管内皮生长因子(VEGF)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(Collagen Ⅳ)、TGF-β、Smad3和Smad7的mRNA和蛋白表达水平。组间分析采用单因素方差分析。结果:IL-1β、IL-6和TNF-α的水平在转染miR-155-5p mimics后增加(496.27±18.87比255.77±21.40， F＝213.184；931.93±78.50比494.90±30.81， F＝80.569；915.70±30.02比486.60±25.05， F＝361.323， P<0.01)，但在转染miR-155-5p inhibitor后下降(140.10±14.77比294.07±10.26， F＝219.855；257.63±33.75比495.47±29.66， F＝84.052；275.47±30.31比484.20±25.34， F＝83.746， P<0.01)。miR-155-5p mimics增加了SV-HUC-1细胞中VEGF、FN和Collagen Ⅳ的mRNA(1.87±0.08比0.96±0.07， F＝251.787；1.78±0.12比0.96±0.06， F＝116.780；2.04±0.12比0.98±0.06， F＝197.344)和蛋白质水平(1.55±0.05比0.98±0.12， F＝60.460；2.28±0.04比1.00±0.11， F＝391.095；1.97±0.06比0.99±0.06， F＝407.516)，但miR-155-5p inhibitor降低了SV-HUC-1细胞中VEGF、FN和Collagen Ⅳ的mRNA(0.47±0.06比0.99±0.07， F＝104.457；0.54±0.06比0.98±0.08， F＝58.767；0.39±0.03比0.96±0.07， F＝162.360)和蛋白质水平(0.35±0.03比0.98±0.09， F＝137.388；0.32±0.05比0.99±0.09， F＝127.047；0.43±0.05比0.98±0.06， F＝137.224， P<0.01)。转染miR-155-5p mimics后TGF-β和Smad3的mRNA表达水平(2.42±0.07比1.01±0.05， F＝817.164；1.87±0.08比0.95±0.02， F＝399.340， P<0.01)和蛋白表达水平(1.56±0.13比0.99±0.05， F＝51.031；1.27±0.02比0.98±0.07， F＝48.519， P<0.05)升高，转染miR-155-5p inhibitor后下降mRNA水平(0.41±0.03比1.02±0.06， F＝249.053；0.38±0.05比1.00±0.04， F＝342.250)和蛋白水平(0.14±0.07比1.02±0.08， F＝194.139；0.72±0.03比1.02±0.09， F＝30.899， P<0.01)；而Smad7的mRNA水平(0.43±0.05比0.97±0.02， F＝301.655)和蛋白水平(0.20±0.03比0.95±0.04， F＝684.122)被miR-155-5p mimics下调并被miR-155-5p inhibitor上调(mRNA水平为2.16±0.07比0.97±0.07， F＝433.500；蛋白水平为1.40±0.09比0.98±0.07， F＝41.779， P<0.01)。 结论:miR-155-5p通过激活TGF-β/Smad信号通路，从而参与创伤性尿道狭窄炎症和纤维化的调节。