木瓜蛋白酶法制备抗氧化活性壳寡糖的工艺优化

为明确高抗氧化活性壳寡糖制备的木瓜蛋白酶法工艺,以壳聚糖为原料,酶解产物的DPPH自由基清除率和总还原力为检测指标,使用单因素试验探究酶底比、酶解温度、pH值、酶解时间对酶解产物抗氧化活性的影响,确定最佳酶解条件为酶底比20％、酶解温度50.00℃、pH 4.80.在单因素试验的基础上,对酶解温度、酶解时间和pH值进行Box-Behnken响应面设计并优化得到最佳酶解条件为酶解温度47.74℃、酶解pH 4.81、酶解时间1 h,预测壳聚糖酶解物的DPPH自由基清除率为65.10％,总还原力为0.323.在酶解温度48.00℃、酶解pH 4.80、酶解时间1 h条件下重复试验得壳聚糖酶解物的DPPH自由基清除率为65.43％±0.71％,IC50为1.86 mg/mL±0.10 mg/mL;总还原力为0.328±0.010,相当于39.44μg/mL±2.94μg/mL抗坏血酸的还原能力,该壳寡糖的平均分子质量为1603 u,产率为45.07％±3.52％,为抗氧化活性壳寡糖的研制提供理论参考.