绿豆实时荧光定量PCR内参基因的筛选与验证

实时荧光定量PCR作为研究基因表达的重要手段,在操作过程中需要内参基因作校正与标准化.本文以绿豆(Vigna radiata)野生型'苏绿1号'(苏绿)及其突变体08 (08)为材料,采用实时荧光定量PCR技术分析6个候选内参基因(EF1α、TUA、TUB、CHS、GADPH、Actin)在不同品种、不同部位(根、茎、叶)及镉诱导前后的表达趋势,继而利用geNorm、NormFinder和BestKeeper这三款软件对候选内参基因的表达稳定性进行综合分析,最后利用目的 基因Nramp5进行验证.实验结果表明,Actin与TUA是所有样品中表达最稳定的内参基因,CHS表达稳定性最差.本研究为将来绿豆基因表达分析的相关研究提供了参考.