范张食酪螨和腐食酪螨的形态学与分子生物学鉴定

目的 对范张食酪螨与腐食酪螨进行形态学和分子生物学鉴定.方法 采集房舍和储藏物样本,从样本中挑取单个成螨,进行纯培养.从培养标本中挑取成螨制成玻片标本.根据无气门亚目螨类检索表,进行形态学鉴定.然后,提取单只螨基因组DNA,通过PCR扩增、测序获得线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因(CO Ⅰ)序列;将所获序列在美国国立生物技术信息中心中用BLAST进行同源性比对.使用Clustal X 1.83软件对2种螨的CO Ⅰ序列进行比对,基于MEGA X软件进行序列分析,并以最大似然法构建系统发育树.结果 范张食酪螨足Ⅱ基节板后缘1/3处明显向内凹陷,下缘曲线近似"S"形,足Ⅰ跗节感棒ω1在远端2/3处明显增宽;而腐食酪螨足Ⅱ基节板呈三角形,下缘平直或略凹,足Ⅰ跗节感棒ω1在远端1/4处增宽.所测得的范张食酪螨和腐食酪螨CO Ⅰ基因序列经BLAST比对显示,分别与GenBank中收录的范张食酪螨和腐食酪螨Co Ⅰ基因序列相似性在99.00％以上.基于CO Ⅰ基因构建的最大似然法系统进化树显示,范张食酪螨和腐食酪螨均独立聚为一支,且支持率均达100％.结论 范张食酪螨和腐食酪螨既可以利用外部特征进行形态学鉴定,也可以基于C0 Ⅰ基因进行分子生物学鉴定;形态学和分子生物学鉴定方法相结合,可以提高螨类近缘种鉴定的准确性.