七氟醚麻醉通过c-fos和神经振荡影响小鼠苏醒期恐惧记忆

目的 探讨c-fos和神经振荡在七氟醚麻醉小鼠苏醒期恐惧记忆中的作用.方法 选择SPF级雄性成年C57BL/6小鼠270只,8～10周龄,体重18～24 g.将小鼠随机分为三组:A组吸入2.5％七氟醚麻醉2 h;B组吸入2.5％七氟醚麻醉6 h;C组吸入2.5％七氟醚麻醉2 h,连续3 d,每组90只.所有小鼠先进行恐惧条件实验训练,训练后1 d进行相应的七氟醚麻醉处理,记录麻醉停止到翻正反射出现(苏醒)的时间.于麻醉前30 min(T0)、翻正反射出现后5 min(T1)、30 min(T2)和60 min(T3)对小鼠进行恐惧条件实验测试,记录冻结时间百分比.于T0、T1时进行旷场试验,记录小鼠运动总路程和在中心区域停留时间.A组随机另取6只小鼠于麻醉前1周在海马组织植入微电极,后将小鼠放回原来的笼子恢复1周,于T0—T3时记录Delta、Theta、Alpha、Beta和Gamma波相对能量值.于T0—T3时采用免疫荧光法检测海马组织c-fos阳性细胞数,采用Western blot法记录海马组织c-fos蛋白相对含量.结果 与T0时比较,T1时A组和B组冻结时间百分比明显升高(P<0.05),B组中心区域停留时间明显缩短(P<0.05).B组停止麻醉到翻正反射出现的时间明显长于A组(P<0.05),T1时冻结时间百分比明显低于A组(P<0.05),T1时中心区域停留时间明显短于A组(P<0.05).C组停止麻醉到翻正反射出现的时间明显短于B组(P<0.05),T1时冻结时间百分比明显低于A组和B组(P<0.05),T1时中心区域停留时间明显长于B组(P<0.05).与T0时比较,A组T1时Theta波和T1、T2时Gamma波相对能量值明显升高(P<0.05),T1时海马CA1区c-fos阳性细胞数明显增多(P<0.05),T1时海马组织c-fos蛋白相对含量明显升高(P<0.05).与T1时比较,A组T3时Theta波和T2、T3时Gamma波相对能量值明显降低(P<0.05),T2、T3时海马CA1区c-fos阳性细胞数明显减少(P<0.05).结论 c-fos表达上调和神经振荡增强参与单次短时间吸入七氟醚增强小鼠苏醒短时间内恐惧记忆的过程,但这一效应随着苏醒后时间的延长而逐渐消失.