圣草酚对过氧化氢所致SH-SY5Y细胞线粒体动力学失衡及凋亡的影响

背景:线粒体动力学异常与神经退行性疾病中氧化应激现象密切相关.课题组前期研究发现圣草酚可以减轻阿尔茨海默病神经损伤,但其是否对线粒体动力学有调控作用尚未明确.目的:探讨圣草酚抑制过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的具体机制.方法:将SH-SY5Y细胞分为如下3组:PBS对照组、过氧化氢(250μmol/L)模型组、过氧化氢(250μmol/L)+圣草酚治疗组(10μmol/L).干预24 h,应用试剂盒检测丙二醛水平和超氧化物歧化酶活性,显微镜下观察细胞形态,TUNEL染色观察细胞凋亡情况,JC-1染色观察线粒体膜电位,免疫荧光染色法和Western blot检测细胞凋亡蛋白以及线粒体融合和线粒体分裂蛋白的表达.结果 与结论:①与过氧化氢组相比,圣草酚治疗组丙二醛水平显著减少,超氧化物歧化酶活性显著增加;②与PBS对照组相比,过氧化氢组细胞密度下降,胞体肥大,细胞凋亡率增加,线粒体模电位下降,Bcl-2表达减少,Bax表达增加;与过氧化氢组相比,圣草酚治疗组上述指标得到明显改善;③与PBS对照组相比,过氧化氢组细胞线粒体分裂相关蛋白p-DRP1和FIS1的表达量升高,而线粒体融合相关蛋白OPA1和Mfn2的表达量降低;与过氧化氢组相比,圣草酚治疗可以降低p-DRP1和FIS1的表达,增加OPA1和Mfn2的表达;④结果说明,圣草酚可通过调控线粒体动力学抑制过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞凋亡.