甜菜碱提高LO2细胞中抗氧化酶的表达水平

该研究探究了甜菜碱(BET)对人正常肝细胞LO2细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)mRNA水平的影响及机制.使用实时荧光定量、蛋白质免疫印迹和酶联免疫吸附法检测细胞内抗氧化酶的mRNA水平,以及Nrf2-Keap1-ARE通路的相关指标.经不同浓度的BET处理12 h后,LO2细胞中SOD、GPx和CAT的mRNA水平显著提高,最高分别提高了1.08、0.51、0.88倍(p<0.05);经250μmol/L BET处理后,LO2细胞核中可与ARE区域结合的Nrf2蛋白水平和细胞内总的NRF2蛋白水平分别显著提高了1.21、0.80倍(p<0.05);经Nrf2蛋白抑制剂鸦胆子苦醇处理后,BET对三种抗氧化酶mRNA水平的提高作用完全丧失;进一步地分析表明,BET并未显著提高Nrf2蛋白的mRNA和磷酸化水平,但将Keap1的mRNA和蛋白质水分别降低了38.21％和49.15％(p<0.05).这些结果表明,BET可通过降低Keap1的水平激活Nrf2-Keap1-ARE通路,进而提高抗氧化酶的mRNA水平.