肾复康对TGF-β1诱导的大鼠成纤维细胞转分化模型的抑制作用及机制

目的:探讨肾复康对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠成纤维细胞转分化模型的抑制作用及机制.方法:采用噻唑兰(MTT)法检测不同浓度肾复康对NRK-49F细胞增殖的作用;试验随机设置空白对照组、模型对照组,糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)3 mmol/L组、肾复康0.25、0.5、1 g/mL组.试剂盒检测细胞上清乳酸含量;采用实时荧光定量PCR检测α-肌动蛋白(α-Sma)、Ⅰ型胶原(Col1a1)、己糖激酶(hexokinase,Hk)、6-磷酸果糖激酶-2(Pfk-2)和葡萄糖转运蛋白4(Glut4) mRNA表达水平;免疫荧光检测α-SMA的蛋白表达水平;Western Blot法检测HK、PFK-2和GLUT4蛋白表达水平.结果:肾复康在0、0.125、0.25、0.5和1 g/mL浓度对NRK-49F细胞增殖无抑制作用;与空白对照组相比,模型对照组乳酸水平显著升高,α-Sma、Col1a1、Hk、聊-2和Glut4 mRNA表达水平显著上调,α-SMA荧光强度增强,HK、PFK-2和GLUT4蛋白表达水平显著上调(P＜0.01);与模型对照组相比,2-DG组及肾复康0.5、1g/mL组乳酸水平显著降低,α-S埘a、Col1a1、Hk、Pfk-2和Glut4 mRNA表达水平明显下调(P＜0.05或P＜0.01),α-SMA荧光水平明显减弱,HK、PFK-2和GLUT4蛋白表达水平显著下调(P＜0.05或P＜0.01).结论:肾复康能够抑制成纤维细胞的转分化纤维生成,且其机制可能与抑制糖酵解有关.