弥漫内生性脑桥胶质瘤靶向治疗新策略的体外筛选与验证

目的·从表观遗传角度寻找和鉴定弥漫内生性脑桥胶质瘤(diffuse intrinsic pontine glioma,DIPG)的单药治疗和组合靶向治疗新策略.方法·以已发表的基于8例DIPG肿瘤组织和6例正常脑组织的转录组数据为基础选择用于筛选实验的靶向小分子库.在DIPG原代细胞SU DIPG13中进行单药筛选并寻找新的能显著抑制DIPG细胞生长的靶向小分子.通过实时定量PCR和Western blotting检测药物处理后其靶基因在mRNA和蛋白水平的表达变化.EdU和Annexin V/碘化丙啶染色后利用流式细胞术分别检测药物处理对DIPG原代细胞增殖和凋亡的影响.靶向小分子库中的药物分别与溴结构域和外端家族(bromodomain and extra terminal protein,BET)抑制剂JQ1和panobinostat组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)进行组合筛选,并体外验证对DIPG存在抑制作用的药物组合.结果·选择了包含66个小分子靶向小分子的药物库用于单药和组合筛选.单药筛选鉴定出的YM155能够显著抑制DIPG原代细胞SU DIPG13和SU_DIPG17的生长,其靶基因BIR C5(baculoviral IAP repeat containing 5;编码survivin)在DIPG肿瘤组织中的表达高于正常组织(P=0.018).YM155能抑制BIR C5在mRNA和蛋白水平的表达.YM155既能抑制DIPG原代细胞的增殖又能促进其凋亡.靶向小分子库中的CX4945、ABT-737分别与JQ1、panobinostat联用能在体外协同抑制DIPG细胞活性.结论·通过单药和组合药物筛选鉴定出了DIPG的靶向治疗新策略,为后续体内验证这些DIPG的新靶向治疗策略和挖掘治疗机制奠定了基础.