白藜芦醇对脓毒症血管内皮屏障功能的保护作用及其机制研究

目的 探讨白藜芦醇在脂多糖诱导的血管内皮屏障功能损伤中的保护作用及其机制.方法 将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分成对照组、脓毒症组及干预组.脓毒症组及干预组使用100μg/mL脂多糖刺激HUVECs制作脓毒症血管内皮细胞损伤模型,干预组在建模前给予白藜芦醇进行预处理.应用细胞计数试剂盒8(CCK-8)及5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)细胞增殖试剂盒检测细胞增殖能力,采用划痕实验及Transwell法检测细胞迁移能力,计算各组单核细胞对内皮细胞的黏附率,采用Western-blotting检测CyclinD1、含IQ模序的三磷酸鸟苷酶活化蛋白1(IQGAP1)、VE-cadherin、claudin-5、细胞间黏附分子1(ICAM-1)及血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的蛋白表达水平,并比较各组细胞内活性氧的含量及核因子κB(NF-κB)入核率.结果 CCK-8及EdU检测发现,各组细胞增殖能力的比较,差异均有统计学意义(F=92.460,P<0.001;F=40.910,P<0.001);划痕试验和Transwell法检测发现,各组细胞迁移能力的比较,差异均有统计学意义(F=27.050,P<0.001;F=56.000,P<0.001);且对照组及干预组的增殖能力及迁移能力均显著高于脓毒症组(P均<0.05).各组细胞间单核细胞对内皮细胞的黏附率(F=19.240,P=0.035),CyclinD1(F=115.900,P<0.001)、IQGAP1(F=116.500,P<0.001)、VE-cadherin(F=108.500,P=0.042)、claudin-5(F=117.100,P=0.028)、ICAM-1(F=43.920,P<0.001)、VCAM-1(F=41.450,P=0.046)的蛋白表达水平,细胞内活性氧的含量(F=30.960,P=0.035)及NF-κB入核率(F=33.410,P=0.028)的比较,差异均有统计学意义.且进一步两两比较发现,与对照组及干预组比较,脓毒症组细胞的CyclinD1、IQGAP1、VE-cadherin及claudin-5蛋白表达水平均显著降低,而单核细胞对内皮细胞的黏附率,ICAM-1及VCAM-1蛋白表达水平,细胞内活性氧的含量及NF-κB入核率均显著升高(P均<0.05).结论 白藜芦醇通过抑制脂多糖诱导下活性氧聚集,减弱NF-κB激活及入核来保护脓毒症血管内皮屏障功能.