microRNA-670-5p靶向调控PDCD4促进鼻咽癌细胞的迁移和侵袭

目的 探究microRNA-670-5p(miR-670-5p)影响鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞迁移和侵袭能力的分子机制.方法 应用qRT-PCR检测人NPC细胞系(6-10B,CNE2,HNE1,5-8F)与人正常鼻咽细胞系(NP69)中miR-670-5p和PDCD4 mRNA的表达水平.分别在NPC细胞6-10B和5-8F中转染miR-670-5p mimics和inhibitor,上调或下调细胞系中的表达.采用划痕愈合实验和Transwell侵袭实验评估miR-670-5p对NPC细胞迁移和侵袭能力的影响.同时,利用生物信息学预测和双荧光素酶报告基因实验探究miR-670-5p影响NPC细胞的潜在机制.此外,采用Western印迹检测miR-670-5p对靶基因蛋白表达的影响.结果 miR-670-5p在NPC细胞中的表达明显高于NP69正常鼻咽细胞.过表达miR-670-5p显著促进6-10B细胞的迁移和侵袭,而抑制miR-670-5p则显著抑制5-8F细胞的迁移和侵袭.生物信息学分析和双荧光素酶报告基因实验证实PDCD4是miR-670-5p的一个下游靶基因,miR-670-5p可通过与PDCD4 mRNA的3′-非翻译区(3′-untranslated region,3′UTR)直接结合,靶向调控NPC细胞中PDCD4的表达.进一步的qRT-PCR和Western印迹结果表明,过表达miR-670-5p显著抑制6-10B细胞中PDCD4 mRNA和蛋白的表达,而转敲低染miR-670-5p明显上调5-8F细胞中PDCD4 mRNA和蛋白的表达.回复实验表明,在miR-670-5p过表达的6-10B细胞中上调PDCD4的表达可恢复miR-670-5p对6-10B细胞迁移和侵袭的影响.结论 miR-670-5p在NPC细胞中表达显著上调,其可通过靶向抑制PDCD4的表达促进NPC细胞的迁移和侵袭,参与NPC的发生发展.上述结果表明,miR-670-5p可能为NPC的治疗提供一个潜在的新靶点.