microRNA-33通过调节巨噬细胞自噬 干预心肌细胞胆固醇代谢受损和功能缺陷

目的 探讨microRNA-33通过调节巨噬细胞自噬对心肌细胞胆固醇代谢受损和功能缺陷的影响.方法 分别培养人单核巨噬细胞和人心肌细胞后将实验分为对照组、miR-33模拟物组(10、5.0、1.0μmol/L组)和miR-33抑制剂组(10、5.0、1.0μmol/L组).分别测定各组巨噬细胞存活率和自噬相关蛋白表达水平、心肌细胞ABCA1和CS的蛋白表达量、胆固醇流出率、心肌细胞活力以及功能缺陷[乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MAD)].结果 各组细胞巨噬细胞存活率和自噬相关蛋白表达水平、心肌细胞ABCA1和CS的蛋白表达量、胆固醇流出率、心肌细胞活力以及功能缺陷比较差异均有统计学意义(P<0.05).其中模拟物组自噬相关蛋白表达水平、巨噬细胞存活率、心肌细胞ABCA1和CS的蛋白表达量和心肌细胞活力高于对照组和抑制剂组,胆固醇流出率低于对照组和抑制剂组,功能缺陷均低于抑制剂组(P<0.05);随着microRNA-33模拟物浓度增大,LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和ATG5、ABCA1和CS蛋白表达水平、LDH和SOD水平均显著升高,MAD水平则显著下降(P<0.05);随着microRNA-33抑制剂浓度增大,心肌细胞胆固醇流出率、MAD水平均显著升高,LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和ATG5蛋白表达水平、心肌细胞活力以及LDH和SOD的水平均显著降低(P<0.05).结论 microRNA-33模拟物能够通过上调巨噬细胞自噬蛋白表达,降低心肌细胞胆固醇代谢水平和功能缺陷的发生,且在本研究范围内,其剂量越高作用效果越显著,而microRNA-33模拟物的调控作用则相反.