柱前衍生高效液相色谱法测定灵芝孢子粉中氨基酸的含量

目的:建立用于测定灵芝孢子粉中氨基酸含量的柱前衍生化高效液相色谱方法.方法:采用邻苯二甲醛(OPA)和9-氯甲酸芴甲酯(FMOC)联用对灵芝孢子粉中的氨基酸进行衍生,色谱条件为:Advance Bio AAA(100 mm×4.6 mm,2.7μm)色谱柱,流动相A为0.01 mol/L磷酸氢二钠和0.01 mol/L硼酸钠溶液,pH值为8.2±0.1,流动相B为甲醇︰乙腈︰水(45︰45︰10).流速:0.8 mL/min,柱温:45℃,进样量:10μL,检测波长:338 nm和262 nm.结果:灵芝孢子粉中检测的17种氨基酸在60 min内分离良好;在一定范围内线性关系良好(r≥0.999,n=6);加样回收率为95.42％～99.38％,实验方法的精密度、重复性和稳定性的相对标准偏差(RSD)均小于3.0％.结论:经方法学验证显示,本研究所建立的实验方法适用于灵芝孢子粉中17种氨基酸的含量测定.