基于Nrf2-Keap1-ARE信号通路探讨疏肝健脾方对肠易激综合征大鼠内脏敏感性的影响

目的 基于核因子E2相关因子2(Nrf2)-Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)-抗氧化反应元件(ARE)信号通路观察疏肝健脾方对肠易激综合征(IBS)大鼠内脏敏感性的影响.方法 取30只SPF级雄性Wistar大鼠采用4％醋酸灌肠复合慢性心理应激法建立IBS大鼠模型,并随机分为模型组、疏肝健脾方组以及阳性对照组(匹维溴铵组),另取10只不予任何处理作为空白组.疏肝健脾方组按5 mL/kg的剂量给予疏肝健脾方,阳性对照组按2 mg/kg的剂量灌胃给匹维溴铵,空白组和模型组按5 mL/kg的剂量给0.9％氯化钠溶液,造模结束后以粪便含水率进行模型评价.给药结束后当天,对粪便含水率进行检测;比较大鼠内脏的敏感性;HE染色检测大鼠结肠组织形态;比较血清胃肠激素水平;检测大鼠血清中氧化应激指标;免疫荧光法检测ZO-1、Occludin蛋白的损伤;Western blotting检测Nrf2-Keap1-ARE通路蛋白表达.结果 与空白组相比,模型组大鼠的粪便含水量,血清中SP、SS、MDA水平,结肠组织中p-Nrf2、p-Keap1、p-ARE蛋白表达水平显著升高;腹部抬起和背部拱起程度,血清中GAS、MTL、SOD、NO水平,结肠黏膜中ZO-1、Occludin表达量显著降低.与模型组相比,疏肝健脾组和阳性对照组大鼠治疗后的粪便含水量,血清中SP、SS、MDA水平,结肠组织中p-Nrf2、p-Keap1、p-ARE蛋白表达水平显著下降;腹部抬起和背部拱起程度,血清中GAS、MTL、SOD、NO水平,结肠黏膜中ZO-1、Occludin表达量显著上升.结论 疏肝健脾方能够有效改善大鼠IBS情况,降低氧化应激水平及结肠黏膜紧密连接蛋白的损伤程度,其机制可能与Nrf2-Keap1-ARE信号通路的调控有关.