双氢青蒿素通过抑制蛋白激酶B和NF-κB P65磷酸化减轻缺血再灌注导致的小鼠心肌损伤

目的 探讨双氢青蒿素(DHA)对心肌缺血再灌注(I/R)小鼠心肌氧化应激损伤作用及其机制.方法 采用左冠状动脉前降支结扎法制备心肌I/R小鼠模型.结扎前20 min,模型+DHA 12.5,25.0和50.0 mg·kg-1组小鼠分别ig给予相应剂量DHA,假手术组和I/R模型组ig给予等量生理盐水,每天1次,连续7 d.检测并记录小鼠心率(HR)、左心室射血分数(LVEF)和左室收缩末期容积(LVESV);用试剂盒测定心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;ELISA检测小鼠血清中肌红蛋白(Mb)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)蛋白表达水平;HE染色观测心肌组织损伤;末端标记法(TUNEL)染色观测心肌细胞凋亡;Western印迹法检测心肌组织中Bax和Bcl-2蛋白表达水平及Akt和NF-κB P65磷酸化水平.结果 心功能超声检测结果显示,与I/R模型组相比,I/R+DHA 25.0和50.0 mg·kg-1组小鼠HR和LVEF明显升高(P<0.05,P<0.01),LVESV明显降低(P<0.05,P<0.01).氧化应激检测结果显示,与I/R模型组比较,I/R+DHA 25.0和50.0 mg·kg-1组小鼠心肌细胞中SOD活性显著升高(均P<0.05),MDA含量显著降低(均P<0.05).ELISA检测结果显示,与I/R模型组比较,I/R+DHA 25.0和50.0 mg·kg-1组小鼠血清中Mb,cTnI和CK-MB含量均显著降低(P<0.05,P<0.01).HE染色结果显示,I/R模型组小鼠心肌组织结构紊乱,可见大量炎性浸润细胞;I/R+DHA 25.0和50.0 mg·kg-1组小鼠心肌组织形态正常,未见炎性浸润细胞.TUNEL检测结果显示,I/R模型组小鼠心肌组织中可见大量凋亡细胞,I/R+DHA 25.0和50.0 mg·kg-1组小鼠心肌组织中仅见极少凋亡细胞.Western印迹结果显示,与I/R模型组相比,I/R+DHA 25.0和50.0 mg·kg-1组小鼠心肌组织中Bax/Bcl-2比值、Akt和NF-κB P65磷酸化水平均显著降低(P<0.05,P<0.01).结论 DHA可缓解心肌I/R小鼠氧化应激和心肌损伤,其机制可能与抑制Akt和NF-κB P65磷酸化有关.