过表达miRNA-217由P13/AKT信号通路促进膀胱癌T24细胞增殖作用

目的 研究miRNA-217是否通过P13/AKT信号通路上调E2F3促进膀胱癌T24细胞增殖作用.方法 收集2017年12月至2018年4月收治的64例膀胱癌患者临床组织.QRT-PCR分别肿瘤组织和癌旁组织中miRNA-217的表达;Western blot检测肿瘤组织和癌旁组织中PI3K、P-AKT、E2F3表达;转染过表达载体miRNA-217上调T24细胞中miRNA-217的表达作为RSK4-miRNA-217组,空白载体microRNA-NC转染T24细胞为RSK4-NC组,以未转染的细胞为空白对照组.qRT-PCR检测3组细胞miRNA-217的表达;CCK-8及平板克隆形成实验、裸鼠皮下荷瘤模型检测3组细胞的增殖及克隆形成能力及成瘤能力;荧光素梅实验观察miRNA-217和PI3K的关系;Western blot检测3组细胞中PI3K、P-AKT、E2F3的表达.结果 肿瘤组织中miRNA-217、PI3K、P-AKT和E2F3的表达高于癌旁组织;与空白对照组和RSK4-NC组比较,RSK4-miRNA-217组细胞OD450、细胞克隆数明显增加,移植瘤体积明显增大(P<0.05),空白对照组和RSK4-NC组间差异无统计学意义(P>0.05);经预测发现miRNA-217和PI3K有互补结合序列,双荧光素酶报告实验证实两者的靶向结合关系;与空白对照组和RSK4-NC组比较,RSK4-miRNA-217组细胞PI3K、p-AKT、E2F3蛋白表达明显升高(P<0.05),在空白对照组和RSK4-NC组细胞中差异无统计学意义(P>0.05).结论 miRNA-217通过P13/AKT信号通路上调E2F3从而促进膀胱癌T24细胞增殖作用.