高效液相色谱同时检测不同类型烟叶中的多种生物碱含量

为快捷准确地测定烟叶中生物碱的含量,本研究通过优化提取条件,建立了测定烟草中烟碱、新烟草碱、假木贼碱和降烟碱的高效液相色谱检测方法.优化后的检测步骤为:干烟叶和5％甲醇的料液比为100 mg/20 mL,在25℃下振荡提取30 min,色谱条件:C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A(90％水+10％甲醇,pH 6.8,0.15％醋酸钠),流动相B(90％甲醇+10％水,pH 3.8).烟碱在0.1～50μg/mL、其余3种在0.005～2μg/mL的范围内,4种生物碱均具有较好的线性关系(R2>0.99);烟碱检出限为0.00065μg/mL,平均回收率100.79％,RSD 3.11％;新烟草碱检出限0.0884μg/mL,平均回收率98.53％,RSD 3.75％;假木贼碱检出限0.0348μg/mL,平均回收率98.70％,RSD 3.63％;降烟碱检出限0.1509μg/mL,平均回收率101.33％,RSD 4.61％.对4种不同类型烟叶共11个不同样品进行检测验证,检测结果可靠.该方法前处理简单快捷,灵敏度高,重复性较好,可以满足烟草样品中4种生物碱的检测要求.