HtrA4在子痫前期孕妇胎盘组织中的表达及与滋养细胞缺氧的相关性

目的 观测高温必需因子A4(HtrA4)在子痫前期(PE)孕妇胎盘组织中的表达情况,探讨其与滋养细胞缺氧和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的相关性.方法 获取基因表达综合(GEO)数据库中PE孕妇胎盘组织芯片数据,分析差异表达基因(DEGs)及HtrA4表达水平.采用Western blot和qRT-PCR法验证HtrA4在PE孕妇胎盘组织中的表达水平.Bewo滋养细胞经HtrA4小干扰RNA(siRNA)(HtrA4 siRNA干扰组)或阴性对照siRNA(阴性对照组)转染后,分别采用MTT法和Transwell法检测细胞增殖和侵袭活性.按1×106个/孔接种细胞,在37℃、20％O2、5％CO2条件下常规培养48 h后,分为HIF-1α激活组、低氧组和对照组.HIF-1α激活组:采用含200μM HIF-1α激活剂氯化钴的细胞培养基,37℃、20％O2、5％CO2继续培养24 h;低氧组:37℃、1％O2、5％CO2继续培养24 h;对照组:继续常规培养24 h.另设立缺氧条件下的HIF-1α抑制组,即细胞经HIF-1αsiRNA干扰后,按1×106个/孔接种细胞,常规培养48 h,再在37℃、1％O2、5％CO2条件下培养24 h.分析HtrA4在缺氧条件下表达量及与HIF-1α表达的相关性.结果 共得到13个DEGs.HtrA4在芯片数据和PE孕妇胎盘组织中表达水平均上调(均P<0.05).与阴性对照组比较,HtrA4 siRNA干扰组侵袭活性下降(P<0.05),但各组间24、48和72h细胞增殖活性比较差异均无统计学意义(均P>0.05).与对照组比较,HIF-1α激活组和低氧组HtrA4和HIF-1α蛋白和mRNA表达水平均上调(均P<0.05).与低氧组比较,HIF-1α抑制组HtrA4和HIF-1α蛋白和mRNA表达水平均下调(均P<0.05).Pearson相关分析发现各组细胞HtrA4与HIF-1αmRNA表达水平呈正相关(r=0.87,P<0.01).结论 HtrA4在PE孕妇胎盘组织中表达上调,能促进滋养细胞的侵袭能力,其表达水平与细胞缺氧及HIF-1α表达水平相关,可能在PE发展中起重要作用.