哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴定标记的筛选

在稚鱼和幼鱼阶段,哲罗鲑Hucho taimen和细鳞鲑Brachymystax lenok外形相似,很难区分,易导致种质混杂,有必要开发简单、易行的方法鉴定二者的种质.本研究从its 1(internal transcribed spacer 1)基因序列中筛选出能够用于区分哲罗鲑和细鳞鲑的DNA分子标记,建立了双重PCR鉴定方法.结果表明:1-its1引物在哲罗鲑中能扩增出334 bp的条带,而在细鳞鲑中无扩增条带.为消除样本DNA降解、实验过程的人为失误等原因造成的结果偏差,本研究添加12SrRNA参照引物,扩增片段为251 bp,并进行了引物比例优化.当1-its1引物和12S rRNA引物体积分别为1 μL(10 pmol)和0.25 μL(2.5 pmol)时,PCR扩增效果较好.哲罗鲑有2条扩增条带分别为334 bp和251 bp,细鳞鲑有1条扩增条带为251 bp.用筛选的1-its1引物和12S rRNA引物比例进行群体分析表明:1-its1引物在哲罗鲑和细鳞鲑的种质鉴定中准确率达100％.本研究结果可为哲罗鲑和细鳞鲑幼鱼鉴定、加工品鉴定、种质资源管理和保护提供有效的方法.